超声破碎

时间:2024-03-05 16:55:03编辑:奇闻君

求助超声波破碎细菌细胞的方法,条件?

超声波细胞破碎仪 工作原理 超声波细胞破碎仪是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎. 超声波细胞破碎仪由超声波发生器和换能器两大部分组成.超声波发生器电路将50/60Hz的市电转换成18-21KHz的高频高压电能,该能量被输到“压电换能器”中,并被转换成高频机械震动,再经“变幅杆”的聚能和振幅位移放大后作用于液体中而产生强大的压力波,这个压力波则会形成千百万的微观气泡,随着高频振动,气泡将迅速增长,然后突然闭合,在气泡闭合时,由于液体间相互碰撞产生强大的冲击波,在其周围产生上千个大气压的压力(即超声空化)。它使得变幅杆顶部产生强有力的剪切活动,并使得气体中的分子强力地被搅动。该能量足以将细胞及各类无机物质破碎重组。 主要用途 超声波细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构,匀质、乳化、混合、脱气、崩解和分散、浸出和提取,加速反映等功能,故广泛应用于生物、医学、化学、制药、食品、化妆品、环保等实验室研究及企业生产。


超声波破碎仪的原理和用途?

超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能,这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡,这些小气泡迅速炸裂,产生的象小炸弹一样的能量,从而起到破碎细胞等物质的作用。
超声波细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构,匀质、乳化、混合、脱气、崩解和分散、浸出和提取,加速反应等功能,故广泛应用于生物、医学、化学、制药、食品、化妆品、环保等实验室研究及企业生产。


超声法破碎细胞提蛋白质的具体步骤

这样说吧,如果我们用原核表达载体表达一段目标基因,我们先把这个基因通过酶切连接的原核表达载体上,再转化到大肠杆菌中进行诱导表达,常用的诱导物是IPTG,37度诱导表达4小时,这样表达出的目标蛋白一般以包涵体的形式存在细菌内,然后用超声破碎细菌,首先将吸取5ml的细菌放入试管中,然后放在超声仪中,开80hz的频率进行破碎细菌,待到细菌全部破碎,溶液变清亮为止,然后你可以洗涤沉淀,进行包涵体蛋白的收集,后面你可以做一个SDS-PAGE蛋白质电泳和Western-blot,这样就可以确定你的要蛋白是不是你的蛋白。
最后,你可以大量的摇菌提取蛋白质了,祝你好运,我也是做这方面的研究,已经做到蛋白质电泳这一步了,祝你好运。


谁能说说用缓冲液,采用超声波破碎细胞的方法提取蛋白质的过程?谢谢

所用样品放在冰盒中,因为超声破碎会发大量的热,如果温度过高会使蛋白变性,设置功率,超4秒,停8秒,看你量的决定超的循环数,一般100次足够了。
要提蛋白的话不能说是用什么过滤,而是离心。
不知道楼上说的超声15秒能破碎多少细胞,反正我看没戏。
离心的话8000rpm就可以 ,当然看你提什么蛋白了,如果某一种蛋白的话,还学要做电泳之类的才可以彻底分开。
千万不要听楼上的,尤其是第二步,如果你辛辛苦苦提的蛋白给煮沸了,那蛋白不就变形了吗? 你的工作就都白做了。


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