激光扫描共聚焦显微镜的激光共聚焦显微镜结构
激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构。在结构 配置上,激光扫描共聚焦显微镜除了包括普通光学显微镜的基本构造外,还包括激光光源、扫描装置、检测器、计算机系统 (包括数据采集、处理、转换、应用软件)、图像输出设备、光学装置和共聚焦系统等部分 [2]。由于该仪器具有高分辨率、高灵敏度、“光学切片”(Optical sectioning)、三维重建、动态分析等优点,因而为基础医学与临床医学的研究提供了有效手段。此外,CLSM 对荧光样品的观察具有明显的优势,只要能用荧光探针进行标记的样品就可用其观察。激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量, 配合焦点稳定系统可以实现长时间活细胞动态观察。
请问激光共聚焦显微镜的应用领域和范围有哪些以及主要可以观察哪些样品?
共聚焦显微镜的光源一般分为激光和白光(Led)两种,当然他们各自的应用范畴也不尽相同。笼统的区分可以分为生物和工业两种大类应用,下面为大家列举一款共聚焦显微镜作示例。德国NanoFocus共聚焦显微镜应用范畴:材料(层压材料、陶瓷、新材料、轻质结构);机械加工(切割/铣削刀具、剃刀、砂纸、涂料、微型刀具);汽车制造业(车身涂层、玻璃系统、气缸内壁);能源(太阳能电池、燃料电池、蓄电池、变速箱、涡轮);印刷和造纸业(印刷筒、纸币、印刷板、防伪鉴别);微系统(MEMS、LED灯具、高性能电子元件、BGA、微透镜)等。
共聚焦显微镜有哪些用途?
以共聚焦显微技术为原理的共聚焦显微镜,在陶瓷、金属、半导体、芯片等材料科学及生产检测领域中有着广泛的应用。它能对器件表面进行非接触式扫描并建立表面3D图像,通过系统软件对器件表面3D图像进行数据处理与分析,从而获取反映器件表面质量的2D、3D参数,实现器件表面形貌3D测量。广泛应用于半导体制造及封装工艺检测、3C电子玻璃屏及其精密配件、光学加工、微纳材料制造、汽车零部件、MEMS器件等超精密加工行业及航空航天、科研院所等领域中。对各种产品、部件和材料表面的面形轮廓、表面缺陷、磨损情况、腐蚀情况、平面度、粗糙度、波纹度、孔隙间隙、台阶高度、弯曲变形情况、加工情况等表面形貌特征进行测量和分析。还有主要应用在生物领域及医学研究中的荧光显微镜,能得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,是形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。