细胞核移植技术是什么?
就是将一个细胞核用显微注射的方法放进另一个细胞里去。前者为供体,可以是胚胎的干细胞核,也可以是体细胞的核。受体大多是动物的卵子。因卵子的体积较大,操作容易,而且通过发育,可以把特征表现出来,因此细胞核移植技术,主要是用来研究胚胎发育过程中,细胞核和细胞质的功能,以及二者间的相互关系;探讨有关遗传,发育和细胞分化等方面的一些基本理论问题。该技术已有几十年的历史。1952年,Briggs 和King在两栖类动物中首次获得核移植成功,使得发育生物学上的几个根本问题得到了解答。Gurdon用非洲爪蟾的上皮细胞等体细胞的核作移植,确立了已经分化的细胞核可以正常发育的事实。我国胚胎学家童第周先生等在鱼类细胞核移植方面做了许多工作。他们在1976年前后首次获得的鲤鲫移核鱼,不仅有理论意义,而且也为鱼类育种开辟了一条新的途径。 哺乳动物的细胞核移植也早已引起关注,因哺乳类受精卵极小,体外培养和细胞核移植技术难度大,因此直到1981年IIImensee和Hoppe才首次报道获得成功。Mcgrath和Solter 在1983年发表了用核移植技术与细胞融合相配合的方法,能将90%以上的移核卵培养到胚泡期。经过胚胎移植,均可获得一定比例的核移植小鼠。 本实验以蛙和哺乳动物为实验材料介绍细胞核移植技术。 实验技术 一、蛙的细胞核移植(图17.1) (一)受体卵的准备 1.去膜: 经人工催产使蛙卵成熟。挤出成熟的蛙卵,逐个去掉卵胶膜,接着把卵整齐地排列在高温灭菌过的培养皿内,使其粘于皿底。并使卵子动物极朝上,以便进行激动和挑核。然后加入适量的手术液,每次可在一个培养皿内排列卵25-40个。 2. 激动: 蛙卵在未受精前仍处于第二次成熟分裂的中期。为了使卵子完成第二次成熟分裂,排出第二极体,在双目解剖镜下,用一枚消毒过的玻璃针在动物极靠近赤道的地区浅刺一下,目的是代替自然受精时精子入卵的过程。由于针刺动作比精子入卵的速度快得多,所以针刺手术要轻缓。激动后的卵子,10-15分钟后产生第二极体。在解剖镜下可见动物极附近有一折光的圆形小球,此即第二极体。 3. 挑核: 当第二极体出现时,用一枚消毒过的玻璃针在极体处斜插入卵子表层,然后迅速提起针尖,由于卵黄膜的破裂,极体下的卵核随着一小部分细胞质流出卵外,形成一个卵外球,一般极体排出15分钟以后会逐渐消失。这样挑核应在极体出先后10分钟内完成,否则核将沉入卵子中心,去核手术不易成功。 4. 再去膜: 挑核后经过10分钟左右,待伤口基本愈合时,用两把磨的很尖的钟表镊子,渐次剥去卵外胶膜,直至余下一层受精膜为止。操作步骤如下:在双目解剖镜下,先将一把尖头镊子的一边尖端从卵子附着皿底的胶膜处小心而快速地插入到最内层胶膜,然后夹紧胶膜,把卵固定住,再用另一把镊子从卵子另一侧夹紧胶膜,向上向后把胶膜掀去,若用两把镊子左右对拉,则易损伤卵子,且使卵质变位,影响胚胎发育。 剥膜后的卵子移到盛有手术液的培养皿中置于玻璃板上,供注核用。 (二)供体细胞的分离 取囊胚或早期原肠胚的外胚层作为供体细胞。先在滤纸上除去胶膜,然后移入皿底涂有一层琼脂的并盛有分离液的培养皿中,用两把镊子剥去胚胎外余下的各层胶膜,切下外胚层,吸去不用的胚胎部分。一个很小的组织块放在分离液内数分钟,并轻轻摇动,细胞便可自行分散。如不分散,可用毛细吸管轻轻吹打。 分散后的胚胎细胞用毛细吸管移到盛有手术液的培养皿中,置于涂有琼脂的小载玻片上,作为移植时的供体细胞。 (三)核移植 1. 显微注射器的准备: 每次手术前应向显微注射器的整个管道系统灌入手术液或双蒸水,检查管道的各衔接处有否漏气。管内只要有一极小的气泡,注射器的调节就失灵。同时应注意选择弹簧上弹性较灵敏的部位以便操作准确(图17.2,17.3,17.4)。 2. 微型吸管的制备: 吸管最好用软质玻璃管。制作前,先将玻管用洗液洗净,再用蒸馏水彻底将酸洗去。这样可使拉出的微吸管内部洁净,不致影响细胞核的吸入和射出。将玻管拉成口径1mm的细管,然后在微火焰上,再拉成微吸管,管径在10-20微米之间(图17.5,17.6)。 3. 吸细胞核: 吸核的方法不是将微吸管头刺入供体细胞内吸取细胞核,而是利用显微操纵台通过轻轻地来回转动千分尺外径,将一个细胞慢慢地吸入微吸管。必须注意微吸管的内径要比细胞小,这样能使被吸入的细胞由于吸力的作用而破裂,结果可以依靠目测,将细胞核和包在它周围的一部分细胞质一起吸入管内,避免细胞核直接与液体接触,以免受损。还应调节使供体细胞尽量靠近管口,避免注核时带入较多的手术液。 4. 注核: 将吸有供体细胞核的微吸管在离动物极45度左右的地方刺入动物半球的中心,再稍微向上提一下管口,然后轻轻地推动微量注射器,把管内的细胞核连同周围的细胞质慢慢地注入卵内。如果注射速度太快,注入卵内的压力过大,则会使卵子破裂,导致实验失败。 一般从首次去胶膜到注完15个左右的核,需2-2.5小时,时间过长,将会影响移核卵的发育。 5. 培养观察: 移核后的卵子转入1/10 Holtfreter 液中,置25℃恒温箱中培养。及时观察卵子的发育并做好记录。 6. 用同批卵按常规人工授精的方法获得受精卵,置培养皿中在同等温度条件下培养,以便与移核卵作对比观察。 二、哺乳动物的细胞核移植 1. 取卵: 取卵的方法与实验十六相同。 2. 去核卵的制作: 用白色小鼠的受精卵作受体,在有相差干涉装置的显微镜下,将预先备好的移核针管头端,借助显微操作器刺入受精卵的透明带,让针头仅穿过透明带而不刺破卵子的质膜。再用针口对准雄核,隔着质膜将其吸入针管内。然后将针口对准雌核,以同样的方法将雌、雄原核吸至针管前端,随即慢慢拔出针管。此时可见到卵子质膜弹性很大,在管口与透明带之间质膜被拉成细丝,然后断开,形成只有细胞质的去核卵和在针管内有两个原核和少量细胞质,外有质膜包裹的两个部分。该去核卵即作受体用(图17.7)。 3. 细胞核移植: 用同法将作供体的黑小鼠受精卵的雌、雄原核吸入针管内,然后吸入少许仙台病毒(Inactivatied Sendai Viras),再将上述针管移至去核卵,让管口穿过透明带原有的小孔进入卵周隙,此时轻轻转动注射器,使外有质膜包裹的雌、雄原核和仙台病毒一起进入受体卵的透明带与质膜之间的卵周隙,然后把针管缓缓抽出即可(图17.8)。如继续观察,能见到在病毒的作用下,移入细胞核所带的质膜与去核的质膜接触处,质膜慢慢溶化消失,雌、雄原核进入受体卵的融合过程。该移核卵子,实际是核质杂交。如果操作成功,在二氧化碳培养箱内培养, 90%以上的卵子可发育至胚泡期,经过胚胎移 植可获得核移植的核质杂交小鼠。 在核移植的全过程中,每一步骤均需严格操作,尽量减少对细胞膜、质和核的损伤,所用的器皿也需严格消毒,防止污染,以提高各个步骤的成活率。 实验材料 1.实验材料: 蛙受精卵,蛙囊胚晚期或原肠早期胚胎,昆明白小鼠,黑小鼠(C57BL―6). 2.实验仪器: 显微操作器、显微注射器、拉针器、酒精喷灯、虹膜剪刀、尖头钟表镊、 内径0.5cm,0.3cm玻璃管、1mm玻璃毛细管、玻璃针、培养皿、弯头吸管、毛细吸管、微吸管、温箱、双目解剖镜、显微镜。 3.实验药品: 手术液:即 Holtfreter液,需煮沸消毒 分离液: NaCl 0.35g KCl 0.005g 双蒸水 100ml 待以上混合液煮沸消毒冷却后加入 EDTA(乙二胺四乙酸) 18.6mg NaHCO3 0.02g Ringer液 70%酒精 2%琼脂
[create_time]2019-07-24 12:33:40[/create_time]2019-07-29 21:08:01[finished_time]2[reply_count]2[alue_good]天高任鸟飞YAO[uname]https://gips0.baidu.com/it/u=3814561114,450490419&fm=3012&app=3012&autime=1660591974&size=b200,200[avatar]TA获得超过1.1万个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]4648[view_count]
【高中生物】植物细胞之间可以进行核移植吗?
可以的。细胞核移植技术,就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中,使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体,使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为胚细胞核移植与体细胞核移植两种。细胞核移植,就是将一个细胞核用显微注射的方法放进另一个细胞里去。前者为供体,可以是胚胎的干细胞核,也可以是体细胞的核。受体大多是动物的卵子。因卵子的体积较大,操作容易,而且通过发育,可以把特征表现出来,因此细胞核移植技术,主要是用来研究胚胎发育过程中,细胞核和细胞质的功能,以及二者间的相互关系;探讨有关遗传,发育和细胞分化等方面的一些基本理论问题。细胞核移植技术已有几十年的历史。1952年,Briggs 和King在两栖类动物中首次获得核移植成功,使得发育生物学上的几个根本问题得到了解答。Gurdon用非洲爪蟾的上皮细胞等体细胞的核作移植,确立了已经分化的细胞核可以正常发育的事实。中国胚胎学家童第周先生等在鱼类细胞核移植方面做了许多工作。他们在1976年前后首次获得的鲤鲫移核鱼,不仅有理论意义,而且也为鱼类育种开辟了一条新的途径。哺乳动物的细胞核移植也早已引起关注,因哺乳类受精卵极小,体外培养和细胞核移植技术难度大,因此直到1981年IIImensee和Hoppe才首次报道获得成功。Mcgrath和Solter 在1983年发表了用核移植技术与细胞融合相配合的方法,能将90%以上的移核卵培养到胚泡期。经过胚胎移植,均可获得一定比例的核移植小鼠。据美国《新科学家》网站报道,日本科学家近日在实验中通过"细胞核移植"技术成功实现了对大龄妇女受损卵子细胞的修复。他们计划在未来的临床应用中继续尝试这种技术以提高大龄妇女卵子细胞的成活率和健康度,增加他们生育的成功率。对于许多大龄妇女来说,随着年龄的增加,她们怀孕的机率也越来越小。而且即使怀孕,她们腹中胎儿发生畸形或病变的机率也很高,因此她们也被称之为危险的高龄产妇。造成这种现象的主要原因之一就在于她们卵子细胞的质量问题,可能是细胞质出现异常或变形。科学家认为,如果能够将她们卵子细胞的细胞核注入到年轻妇女健康的细胞质中,通过"细胞核移植"技术实现对大龄妇女异常卵子细胞的修复,不仅仅可以提高卵子细胞的成活率,而且还可以排除多种遗传病所引发的各种隐患。在卵子的细胞质中,如果存在缺陷线粒体的话,出生的婴儿将可能会患有某些遗传病。主要步骤日本北九州市圣母医院科学家田中笃等人在实验中正是通过这种"细胞核移植"技术实现二合一"混卵"的目标,让大龄妇女异常卵子细胞重新焕发活力。1、他们从多位接受试管受孕的大龄妇女体内采集了31个卵子细胞,并将其中的细胞核提取出来。2、再将这些细胞核注入到年轻妇女的卵子细胞质中。这些捐献卵子的年轻妇女年龄都在35岁以下,身体健康。从移植的结果看,共有25个"混卵"细胞可以存活。这25个"混卵"细胞与精子相结合后,其中有7个"混卵"细胞形成了初期的胚胎,成功率为28%。此前未经修复的卵子细胞受精成功率仅为3%。3、如果我们再能够移植这些已经成形的胚胎的话,据田中笃介绍,他们下一步的目标就是将这些胚胎移植到大龄妇女体内。【文献】植物学* 徐兴友,郭学民 主编植物细胞工程* 谢从华 高等教育出版社
[create_time]2018-05-26 17:25:36[/create_time]2018-05-26 20:23:15[finished_time]1[reply_count]2[alue_good]百度网友81818b546[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.3d8c175e.faJbS8ySnx8lhRKwzXWeJA.jpg?time=3245&tieba_portrait_time=3245[avatar]TA获得超过298个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]1157[view_count]体细胞核移植的体细胞核移植的过程
从供体身体的某一部位上取体细胞,并通过体细胞培养技术对该体细胞进行增殖。采集卵母细胞,体外培养到减数第二次分裂中期,通过显微操作去除卵母细胞中的核,由于减二中期细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管可以一并吸出细胞核和第一极体。 体外完成早期胚胎培养后,将胚胎移植入代孕母体内,使其继续发育为新个体。
[create_time]2018-10-11 19:11:36[/create_time]2016-06-15 05:34:50[finished_time]1[reply_count]12[alue_good]從者7z[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.bed5dc15.oHHIOMjbina54tGEcHheQA.jpg?time=3666&tieba_portrait_time=3666[avatar]TA获得超过365个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]6593[view_count]动物体细胞核移植的方法有哪些 动物体细胞核移植的方法简述
体细胞核移植又称体细胞克隆,原理即细胞核的全能性,是动物细胞工程技术的常用技术手段。方法如下。
1、细胞核的采集和卵母细胞的准备
从供体身体的某一部位上取体细胞,并通过体细胞培养技术对该体细胞进行增殖。
采集卵母细胞,体外培养到减数第二次分裂中期,通过显微操作去除卵母细胞中的核,由于减二中期细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管可以一并吸出细胞核和第一极体。
2、细胞促融
将供体细胞注入去核卵母细胞通过电刺激使两细胞融合,供体细胞进入受体卵母细胞内构建重组胚胎,通过物理或化学方法(如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程。
3、植入代孕母体
体外完成早期胚胎培养后,将胚胎移植入代孕母体内,使其继续发育为新个体。
[create_time]2022-07-04 16:01:28[/create_time]2022-07-16 00:04:37[finished_time]1[reply_count]0[alue_good]华源网络[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.dda57034.Ka_C7foUo-WdM44LpZjJrw.jpg?time=707&tieba_portrait_time=707[avatar]TA获得超过4549个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]82[view_count]
动物体细胞核移植的方法有哪些
体细胞核移植又称体细胞克隆,原理即细胞核的全能性,是动物细胞工程技术的常用技术手段。方法如下。
1、细胞核的采集和卵母细胞的准备
从供体身体的某一部位上取体细胞,并通过体细胞培养技术对该体细胞进行增殖。
采集卵母细胞,体外培养到减数第二次分裂中期,通过显微操作去除卵母细胞中的核,由于减二中期细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管可以一并吸出细胞核和第一极体。
2、细胞促融
将供体细胞注入去核卵母细胞通过电刺激使两细胞融合,供体细胞进入受体卵母细胞内构建重组胚胎,通过物理或化学方法(如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程。
3、植入代孕母体
体外完成早期胚胎培养后,将胚胎移植入代孕母体内,使其继续发育为新个体。
[create_time]2022-12-09 05:42:21[/create_time]2022-12-23 12:47:40[finished_time]1[reply_count]0[alue_good]马大姐种地[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.318b91f5.2hEtJdP8dlVUGBikz_3s4w.jpg?time=4525&tieba_portrait_time=4525[avatar]TA获得超过950个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]25[view_count]
核移植的过程是什么?
细胞核移植,就是将一个细胞核用显微注射的方法放进另一个细胞里去。前者为供体,可以是胚胎的干细胞核,也可以是体细胞的核。受体大多是动物的卵子。因卵子的体积较大,操作容易,而且通过发育,可以把特征表现出来,因此细胞核移植技术,主要是用来研究胚胎发育过程中,细胞核和细胞质的功能,以及二者间的相互关系;探讨有关遗传,发育和细胞分化等方面的一些基本理论问题。该技术已有几十年的历史。1952年,Briggs 和King在两栖类动物中首次获得核移植成功,使得发育生物学上的几个根本问题得到了解答。Gurdon用非洲爪蟾的上皮细胞等体细胞的核作移植,确立了已经分化的细胞核可以正常发育的事实。我国胚胎学家童第周先生等在鱼类细胞核移植方面做了许多工作。他们在1976年前后首次获得的鲤鲫移核鱼,不仅有理论意义,而且也为鱼类育种开辟了一条新的途径。
哺乳动物的细胞核移植也早已引起关注,因哺乳类受精卵极小,体外培养和细胞核移植技术难度大,因此直到1981年IIImensee和Hoppe才首次报道获得成功。Mcgrath和Solter 在1983年发表了用核移植技术与细胞融合相配合的方法,能将90%以上的移核卵培养到胚泡期。经过胚胎移植,均可获得一定比例的核移植小鼠。
本实验以蛙和哺乳动物为实验材料介绍细胞核移植技术。
实验技术
一、蛙的细胞核移植(图17.1)
(一)受体卵的准备
1.去膜:
经人工催产使蛙卵成熟。挤出成熟的蛙卵,逐个去掉卵胶膜,接着把卵整齐地排列在高温灭菌过的培养皿内,使其粘于皿底。并使卵子动物极朝上,以便进行激动和挑核。然后加入适量的手术液,每次可在一个培养皿内排列卵25-40个。
2. 激动:
蛙卵在未受精前仍处于第二次成熟分裂的中期。为了使卵子完成第二次成熟分裂,排出第二极体,在双目解剖镜下,用一枚消毒过的玻璃针在动物极靠近赤道的地区浅刺一下,目的是代替自然受精时精子入卵的过程。由于针刺动作比精子入卵的速度快得多,所以针刺手术要轻缓。激动后的卵子,10-15分钟后产生第二极体。在解剖镜下可见动物极附近有一折光的圆形小球,此即第二极体。
3. 挑核:
当第二极体出现时,用一枚消毒过的玻璃针在极体处斜插入卵子表层,然后迅速提起针尖,由于卵黄膜的破裂,极体下的卵核随着一小部分细胞质流出卵外,形成一个卵外球,一般极体排出15分钟以后会逐渐消失。这样挑核应在极体出先后10分钟内完成,否则核将沉入卵子中心,去核手术不易成功。
4. 再去膜:
挑核后经过10分钟左右,待伤口基本愈合时,用两把磨的很尖的钟表镊子,渐次剥去卵外胶膜,直至余下一层受精膜为止。操作步骤如下:在双目解剖镜下,先将一把尖头镊子的一边尖端从卵子附着皿底的胶膜处小心而快速地插入到最内层胶膜,然后夹紧胶膜,把卵固定住,再用另一把镊子从卵子另一侧夹紧胶膜,向上向后把胶膜掀去,若用两把镊子左右对拉,则易损伤卵子,且使卵质变位,影响胚胎发育。
剥膜后的卵子移到盛有手术液的培养皿中置于玻璃板上,供注核用。
(二)供体细胞的分离
取囊胚或早期原肠胚的外胚层作为供体细胞。先在滤纸上除去胶膜,然后移入皿底涂有一层琼脂的并盛有分离液的培养皿中,用两把镊子剥去胚胎外余下的各层胶膜,切下外胚层,吸去不用的胚胎部分。一个很小的组织块放在分离液内数分钟,并轻轻摇动,细胞便可自行分散。如不分散,可用毛细吸管轻轻吹打。
分散后的胚胎细胞用毛细吸管移到盛有手术液的培养皿中,置于涂有琼脂的小载玻片上,作为移植时的供体细胞。
(三)核移植
1. 显微注射器的准备:
每次手术前应向显微注射器的整个管道系统灌入手术液或双蒸水,检查管道的各衔接处有否漏气。管内只要有一极小的气泡,注射器的调节就失灵。同时应注意选择弹簧上弹性较灵敏的部位以便操作准确(图17.2,17.3,17.4)。
2. 微型吸管的制备:
吸管最好用软质玻璃管。制作前,先将玻管用洗液洗净,再用蒸馏水彻底将酸洗去。这样可使拉出的微吸管内部洁净,不致影响细胞核的吸入和射出。将玻管拉成口径1mm的细管,然后在微火焰上,再拉成微吸管,管径在10-20微米之间(图17.5,17.6)。
3. 吸细胞核:
吸核的方法不是将微吸管头刺入供体细胞内吸取细胞核,而是利用显微操纵台通过轻轻地来回转动千分尺外径,将一个细胞慢慢地吸入微吸管。必须注意微吸管的内径要比细胞小,这样能使被吸入的细胞由于吸力的作用而破裂,结果可以依靠目测,将细胞核和包在它周围的一部分细胞质一起吸入管内,避免细胞核直接与液体接触,以免受损。还应调节使供体细胞尽量靠近管口,避免注核时带入较多的手术液。
4. 注核:
将吸有供体细胞核的微吸管在离动物极45度左右的地方刺入动物半球的中心,再稍微向上提一下管口,然后轻轻地推动微量注射器,把管内的细胞核连同周围的细胞质慢慢地注入卵内。如果注射速度太快,注入卵内的压力过大,则会使卵子破裂,导致实验失败。
一般从首次去胶膜到注完15个左右的核,需2-2.5小时,时间过长,将会影响移核卵的发育。
5. 培养观察:
移核后的卵子转入1/10 Holtfreter 液中,置25℃恒温箱中培养。及时观察卵子的发育并做好记录。
6. 用同批卵按常规人工授精的方法获得受精卵,置培养皿中在同等温度条件下培养,以便与移核卵作对比观察。
二、哺乳动物的细胞核移植
1. 取卵:
取卵的方法与实验十六相同。
2. 去核卵的制作:
用白色小鼠的受精卵作受体,在有相差干涉装置的显微镜下,将预先备好的移核针管头端,借助显微操作器刺入受精卵的透明带,让针头仅穿过透明带而不刺破卵子的质膜。再用针口对准雄核,隔着质膜将其吸入针管内。然后将针口对准雌核,以同样的方法将雌、雄原核吸至针管前端,随即慢慢拔出针管。此时可见到卵子质膜弹性很大,在管口与透明带之间质膜被拉成细丝,然后断开,形成只有细胞质的去核卵和在针管内有两个原核和少量细胞质,外有质膜包裹的两个部分。该去核卵即作受体用(图17.7)。
3. 细胞核移植:
用同法将作供体的黑小鼠受精卵的雌、雄原核吸入针管内,然后吸入少许仙台病毒(Inactivatied Sendai Viras),再将上述针管移至去核卵,让管口穿过透明带原有的小孔进入卵周隙,此时轻轻转动注射器,使外有质膜包裹的雌、雄原核和仙台病毒一起进入受体卵的透明带与质膜之间的卵周隙,然后把针管缓缓抽出即可(图17.8)。如继续观察,能见到在病毒的作用下,移入细胞核所带的质膜与去核的质膜接触处,质膜慢慢溶化消失,雌、雄原核进入受体卵的融合过程。该移核卵子,实际是核质杂交。如果操作成功,在二氧化碳培养箱内培养, 90%以上的卵子可发育至胚泡期,经过胚胎移
植可获得核移植的核质杂交小鼠。
在核移植的全过程中,每一步骤均需严格操作,尽量减少对细胞膜、质和核的损伤,所用的器皿也需严格消毒,防止污染,以提高各个步骤的成活率。
实验材料
1.实验材料:
蛙受精卵,蛙囊胚晚期或原肠早期胚胎,昆明白小鼠,黑小鼠(C57BL―6).
2.实验仪器:
显微操作器、显微注射器、拉针器、酒精喷灯、虹膜剪刀、尖头钟表镊、
内径0.5cm,0.3cm玻璃管、1mm玻璃毛细管、玻璃针、培养皿、弯头吸管、毛细吸管、微吸管、温箱、双目解剖镜、显微镜。
3.实验药品:
手术液:即 Holtfreter液,需煮沸消毒
分离液:
NaCl 0.35g
KCl 0.005g
双蒸水 100ml
待以上混合液煮沸消毒冷却后加入
EDTA(乙二胺四乙酸) 18.6mg
NaHCO3 0.02g
Ringer液
70%酒精
2%琼脂
[create_time]2013-08-04 19:59:09[/create_time]2013-08-18 17:17:33[finished_time]2[reply_count]7[alue_good]匿名用户[uname]https://iknow-base.cdn.bcebos.com/yt/bdsp/icon/anonymous.png?x-bce-process=image/quality,q_80[avatar][slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]2988[view_count]
7、体细胞核移植技术为什么要选择MⅡ期的去核卵母细胞作受体细胞?
因为MⅡ期的卵母细胞中含有促进供体核表达全能性的物质,即成熟促进因子(MPF),而且活性很高。虽然MⅠ期卵母细胞也有活性较高的MPF,但MⅠ期卵母细胞的细胞核、细胞质尚未成熟,其细胞质不能支持胚胎的全程发育。所以不能作为受体卵母细胞。早期核移植技术中常用受精卵作为受体细胞。但作为卵母细胞细胞质中重要的胞质影响因子MPF,其活性崽卵母细胞减数分裂的MⅠ期和MⅡ期达到最高,受精或激活后,MPF迅速灭火,所以不再用受精卵作为受体细胞。
MⅡ期卵母细胞在作为核受体细胞时要去核,主要是为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要价值的动物提供的体细胞。
[create_time]2020-04-25 21:29:50[/create_time]2019-08-08 20:46:59[finished_time]1[reply_count]11[alue_good]徐雅惠始嫚[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.368b77e5.xgz_Ql_vTZzuSs2x56Q-0A.jpg?time=10584&tieba_portrait_time=10584[avatar]TA获得超过3万个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]1843[view_count]
体细胞核移植技术中,为什么用次级卵母细胞作为受体细胞,而不使用受精卵?
>细胞核移植技术中能用受体细胞的通常有MⅡ期卵母细胞和受精卵。早期的核移植常用受精卵,后来基本上用MⅡ期卵母细胞取代了受精卵,主要是两者的细胞质环境不同。有人认为重组需要的因子存在于MⅡ期卵母细胞质中,而在受精卵形成时这些因子已被降解或用光,因此受精卵去核可引起细胞质中重组因子缺乏。促成熟因子(MFP)是卵母细胞质中重要的胞质影响因子,MFP的活性在卵母细胞减数分裂的MⅠ和MⅡ期达到最高,受精或激活后MFP迅速失活,因此MⅡ期卵母细胞中MFP活性高,而受精卵中MFP活性低。而MFP水平的高低可影响供体核染色质的状态和复制。MⅡ期卵母细胞细胞核、细胞质已成熟,而MⅠ期卵母细胞细胞核、细胞质尚未成熟,其细胞质不能支持胚胎的全程发育,因此尽管MⅠ期卵母细胞MFP活性也高,但不能作为受体卵母细胞。也有人认为用去核受精卵作受体时可能由于受精卵去核时一些早期发育必需的因子随核的去除而去掉,而使受精卵缺乏发育能力。因此,目前广泛采用MⅡQI
5卵母细胞做受体。
细胞核移植用的是处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞的细胞质。此时的细胞质有助于恢复细胞核的全能性。此时所说“细胞核”实际上主要指的是核区的染色体。不能机械的理解为“细胞核结构”
[create_time]2020-04-11 03:10:39[/create_time]2019-09-13 18:39:07[finished_time]1[reply_count]5[alue_good]靳增岳堂媪[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.a364e4.-yXnn51Kw2RB0I4x84gT2A.jpg?time=10649&tieba_portrait_time=10649[avatar]TA获得超过3.6万个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]653[view_count]
胚胎核移植与体细胞核移植的区别
胚胎移植是由精子和卵细胞结合后,并且已分化成囊胚期的细胞移植到母体胎盘上,进行发育。
它发育的个体含有父母双方的特性。
体细胞核就只是单单移植细胞核到去核卵细胞,再放到母体胎盘内发育。
他发育的个体就只有提供细胞核的那一方的特性。
希望帮到你,望采纳。谢谢。
[create_time]2011-08-22 17:08:52[/create_time]2011-08-22 17:14:33[finished_time]2[reply_count]56[alue_good]叹息的美[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.a8b1fd67.wwto4jZZZqMPY0_DA31cBQ.jpg?time=2027&tieba_portrait_time=2027[avatar]TA获得超过831个赞[slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]6950[view_count]
动物细胞核移植可以用来人体器官移植
你好,亲,很高兴为你服务,通过官方查询显示,动物细胞核移植可以用来人体器官移植是可以实现的。【摘要】
动物细胞核移植可以用来人体器官移植【提问】
你好,亲,很高兴为你服务,通过官方查询显示,动物细胞核移植可以用来人体器官移植是可以实现的。【回答】
亲亲,官方显示将动物细胞或器官移植到人体内,已经成为医学界关注和研究的热点。但仍有不少科学家表示,由于动物和人之间存在着不可逾越的种族差异,因此短期内不能贸然实施异种移植。成功病例让人兴奋澳大利亚活性细胞技术公司的决定,源于10年前进行的世界首例动物细胞人体移植。那名被移植者叫迈克尔·赫利尔,今年51岁。1996年,他因身患1型糖尿病,每天要打胰岛素来维持血糖浓度。由于疾病恶化,赫利尔不得不寻求新的治疗方法,并在鲍博·艾略特教授的帮助下,运用腹部注射方式,植入了猪细胞。【回答】
艾略特教授说:“这是史无前例的成功,是向安全、有效和持久控制糖尿病迈出的重要一步。赫利尔的病例表明,猪细胞能在人体中存活相当长的时间,且不会产生不良影响。”美国研究人员也在使用不同动物作异种移植的试验,如把猪的胰岛素生成细胞,移植给患糖尿病的猴子,使猴子的病症好转。但试验大剂量使用抗排异药物,是人体无法承受的。有专家表示,向人体移植动物细胞仅仅是“小试牛刀”,最终目的是实现动物器官移植。【回答】
[create_time]2022-08-17 00:03:14[/create_time]2022-08-31 23:57:21[finished_time]1[reply_count]0[alue_good]帐号已注销[uname]https://himg.bdimg.com/sys/portrait/item/wise.1.e90d96d7.0tZUn2O5CnXYv-QinwwUNw.jpg?time=8684&tieba_portrait_time=8684[avatar][slogan]这个人很懒,什么都没留下![intro]35[view_count]