sds聚丙烯酰胺凝胶电泳

时间:2024-08-27 14:21:10编辑:奇闻君

聚丙烯酰胺凝胶电泳是利用什么原理制成的?

过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。扩展资料:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度,一般只需要不到微克量级的蛋白质,而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况,这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。参考资料:百度百科-聚丙烯酰胺凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。具体如下:1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;过硫酸铵或加核黄素后用紫外光(波长253.7毫微米)引发聚合。3、聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链,双体的作用是在长链之间形成交联,成为具有三维网状结构的凝胶。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用,从而增高了它的分辨能力。4、聚合时,根据分离的需要,可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶。在分离血清蛋白时,采用的丙烯酰胺总浓度为6.5%,内含单体96%,双体4.5%5、聚合物分子中含有很多酰胺基,所以凝胶具有良好的亲水性,能在水中溶胀但不溶解。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中SDS的作用是

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中SDS的作用是

A.破坏蛋白质中氢键

B.通过疏水的尾巴与肽链中氨基酸的疏水侧链结合,来维持蛋白质的变性的状态

C.带有大量的负电荷,掩盖蛋白质本身带有的电荷,因此它可以消除各个蛋白质分子之间的电荷的差异

D.破坏蛋白质的二硫键

正确答案:通过疏水的尾巴与肽链中氨基酸的疏水侧链结合,来维持蛋白质的变性的状态;带有大量的负电荷,掩盖蛋白质本身带有的电荷,因此它可以消除各个蛋白质分子之间的电荷的差异


SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳原理上有何不同?

最大的不同是聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理。SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附。使肽链带净负电荷,蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关。聚丙烯酰氨(PAGE)凝胶电泳用于蛋白质与寡糖核苷酸的分离。电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小,电荷因素可以忽视。扩展资料:聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带,如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质,蛋白质样品电泳后,就应只分离出一条区带。SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合形成密度相同的短棒状复合物,不同分子量的蛋白质形成的复合物的长度不同,其长度与蛋白质分子量呈正相关,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。参考资料来源:百度百科-SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

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