高效液相色谱法用于含量测定的原理是什么?
原理是该物质（的官能团）在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比.即：A样品/A对照=C样品/C对照
C,为浓度,可以理解成C=质量（mg）*纯度（%）/稀释倍数（ml）
所以在使用标准品进行含量标定的时候,标准品的纯度是已知的量,称取一定量标准品后进行定容稀释.进样分析后,峰面积可从图谱上读取（A样品）.
样品也称取一定的质量,稀释后进样分析.然后读取峰面积（A对照）.公式中之后样品纯度是未知数,最后计算结果.
也有情况是在没有标准品的情况下用面积归一化法计算的,就是进样后从图谱上读取杂质,按照峰面积的百分比计算.这种方式有很大的局限性,故不经常使用
高效液相色谱法有哪些特点
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，小于1小时。3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。6、柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物7、样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。高效液相色谱分析的流程由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。以上内容参考：百度百科-高效液相色谱、百度百科-高效液相色谱分析法
液相色谱图数据怎么看
液相色谱图(LC图)是一种常见的分析化学技术，用于分离和检测混合物中的化合物。液相色谱图的图形通常由两个轴组成，一个是时间轴，另一个是检测器响应轴，通常是吸光度或荧光强度。在液相色谱图数据中，需要注意以下几个方面：1. 峰的形状：峰的形状可以告诉你化合物的纯度、对称性和是否存在杂质。对称、尖锐的峰通常是高纯度化合物或单一化合物的特征。不对称或宽峰可能是杂质的存在。2. 峰的高度：峰高度反映化合物的浓度。峰高度越高，表示化合物浓度越高。3. 峰的面积：峰面积是峰高度和宽度的积分，反映了化合物在样品中的相对含量。峰面积越大，表示化合物在样品中含量越高。4. 保留时间：保留时间是化合物从进样口进入柱子到出柱子的时间。保留时间可以用来确定化合物的特定性质，如极性、亲水性、亲油性等。
液相色谱图数据怎么看
横坐标是时间轴，每个峰顶点对应的时间为该物质（峰）保留时间；
纵坐标是响应强度，即在一定波长下被检测物质的反应强度（紫外），响应强度通常用峰高或者峰面积表示，最常用的是峰面积大小，代表物质的量，与物质的量成正比；
分离度（两峰之间分离程度）、是否拖尾还是前沿峰、信噪比等这些参数也需要看，具体可以参照分析化学的教材。【摘要】
液相色谱图数据怎么看【提问】
横坐标是时间轴，每个峰顶点对应的时间为该物质（峰）保留时间；
纵坐标是响应强度，即在一定波长下被检测物质的反应强度（紫外），响应强度通常用峰高或者峰面积表示，最常用的是峰面积大小，代表物质的量，与物质的量成正比；
分离度（两峰之间分离程度）、是否拖尾还是前沿峰、信噪比等这些参数也需要看，具体可以参照分析化学的教材。【回答】
高效液相色谱法中样品稀释为什么选用流动相
用流动相稀释样品主要是为了提高分离度,增加理论塔板数,使峰形尖锐,对称.具体理由如下：
色谱法的实质是样品在流动相与固定相之间反复分配的过程,这个过程在实际中会受到很多因素的影响从而造成分离度下降,理论塔板数降低,使得分离不理想.
根据液相色谱Van Deemter方程H = A + Cμ（A为涡流扩散系数,C为传质阻抗系数,μ为流动相流速）.
涡流扩散主要由色谱柱本身造成.
传质阻抗是阻碍组分分子在固定相和流动相之间达到平衡需要进行分子的吸附、脱附、溶解、扩散等过程的因素.在理想状态中,色谱柱的传质阻抗为零,则组分分子流动相和固定相之间会迅速达到平衡,在实际体系中传质阻抗不为零.用流动相溶解稀释样品,是为了减少传质阻抗,提高分离塔板数,使得峰尖锐,对称.
高效液相色谱法对流动相的基本要求有哪些
高效液相色谱法对流动相的基本要求有（1）溶剂对于待测样品。必须具有合适的极性和良好的选择性。（2）溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长。所谓溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透明的，它严重干扰组分的吸收测量。对于折光率检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达最高灵敏度。（3）高纯度。由于高效液相灵敏度高，对流动相溶剂的纯度也要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳，或产生“伪峰”。痕量杂质的存在，将使截止波长值增加50～IOOnm。
